产品货号:
GS0260
中文名称:
PCNA细胞增殖检测试剂盒(免疫荧光)
英文名称:
PCNA Cell Proliferation Kit(IF)
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
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PCNA即增殖细胞核抗原,是一种分子量为36KD的核蛋白,它为细胞DNA多聚酶“δ”的辅助蛋白,是真核细胞DNA合成时所必需的一种酸性核蛋白。PCNA在细胞核内合成,并储存在核内,细胞处于静止状态时,其含量很低,当细胞进入增殖周期中,其表达明显增加,故PCNA是反映细胞增殖状态的良好指标。
组分 | 规格 |
Anti-PCNA Rabbit Polyclonal antibody | 100μL |
Cy3-conjugated Goat anti-Rabbit IgG | 50μL |
保存:-20℃避光。
洗涤液:PBS缓冲液(PH7.4)
固定液:4%多聚甲醛溶解于PBS中,pH7.4,新鲜配置;
通透液:0.1%的Triton X-100溶解于0.1%柠檬酸钠溶液;
封闭液:用3%BSA溶解于PBS中。
- 所有的管子在打开之前需要先离心。
- 固定:将处理好的样品(细胞接种在盖玻片上)用新鲜配制的4%多聚甲醛室温固定45~60分钟。
- 洗涤:PBS洗3次,每次5分钟。
- 通透:0.1%~0.5%的Triton X-100室温透膜5~10分钟。
- 洗涤:PBS洗3次,每次5分钟。
- 封闭:加适量封闭液,湿盒中室温孵育30~45分钟。
- 弃封闭液后,轻轻擦干样品周围的封闭液。
- 加一抗:按1:100~1:250用封闭液稀释Anti-PCNA Rabbit antibody;每个样品中加入稀释好的Anti-PCNA Rabbit antibody,4℃湿盒中孵育过夜。
- 复温:从4℃冰箱取出,室温孵育60分钟。
- 洗涤:PBS洗3次,每次5分钟。
- 洗涤后,轻轻擦干样品周围的PBST溶液。
- 加荧光标记二抗:每个样品加入50μL Cy3-conjugated Goat anti-Rabbit IgG (按1:50~200稀释),室温,避光孵育60分钟。
- 洗涤:PBS洗3次,每次5分钟。
- 复染:在拍照之前用DAPI进行复染
- 在波长550nm处,用荧光倒置显微镜进行检测分析。
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